Kinyoun пятно - Kinyoun stain

В Киньюн метод или Kinyoun пятно (холодный метод), разработанный Джозеф Дж. Киньюн, это процедура, используемая для пятно кислотоустойчивый виды бактериальных родов Микобактерии и Нокардия[1] и апикомплекс род Криптоспоридиум. Это разновидность метода, разработанного Робертом Кохом в 1882 году. У некоторых видов бактерий в клеточных стенках есть восковой липид, называемый миколовой кислотой, который позволяет им окрашиваться кислотостойкостью лучше, чем красителем по Граму. Уникальная способность микобактерий противостоять обесцвечиванию под действием кислоты и спирта, поэтому их называют кислотоустойчивыми.[2] Он подразумевает нанесение основного красителя (основной фуксин ), обесцвечивающее средство (кислотно-спиртовое) и контрастное краситель (метиленовый синий ).[3] в отличие от Пятно Циля-Нильсена (Окрашивание Z-N) метод окрашивания Киньюн не требует нагревания.[4][5] В красителях Циля-Нильсена тепло действует как физическая протрава, в то время как фенол (карбол карбол фушин) действует как химическая протрава. Поскольку окрашивание по Киньюну является холодным методом (без применения тепла), концентрация используемого карбол фушина увеличивается.[6]

Резюме кислотоустойчивого окрашивания (пятно Киньюна)
ПрименениеРеагентЦвет ячейки
Кислотный быстроНекислотное быстрое
Первичный красительКарбол фуксинКрасныйКрасный
Обесцвечивающее средствоКислый спиртКрасныйБесцветный
Счетчик пятенМетиленовый синийКрасныйСиний

Процедура окрашивания

Окраска кинёна на организме Mycobacterium smegmatis

Сделайте кислотостойкое пятно [7]

Материалы

  • Слайд с мазком организма
  • Карбол Фуксин
  • Кислота-Спирт
  • Метиленовый синий
  • библейская бумага
  • Микроскоп

инструкции

  1. Сделайте мазок на предметном стекле с организмами
    • Очистить слайд, восковую этикетку, размазать организм, высушить на воздухе в течение 10 минут, закрепить нагреванием
  2. Окуните слайд в Carbol Fuchsin на 20 минут.
  3. Промыть слайд
  4. Окуните слайд в кислотно-спиртовой раствор на 3-5 секунд.
  5. Полоскание слайда
  6. Окуните предметное стекло в метиленовый синий на 30 секунд.
  7. Полоскание слайда
  8. Промокните предметное стекло сухой бумагой для выпечки.
  9. Наблюдайте под микроскопом.

Модификация

Метод Киньюна можно модифицировать как средство, устойчивое к слабым кислотам, при котором вместо соляной кислоты используется 5% серная кислота. Слабое кислотостойкое окрашивание в дополнение к окрашиванию микобактерий будет окрашивать организмы, которые не могут поддерживать карбол-фуксин после обесцвечивания с помощью HCl.

Смотрите также

использованная литература

  1. ^ Гео Ф. Б. и др., Медицинская микробиология Явца, Мельника и Адельберга, 25-е издание, Lange Medical, 2004, стр. 182
  2. ^ .dalynn (октябрь 2014 г.). "KINYOUN CARBOL FUCHSIN STAIN" (PDF).
  3. ^ Хасси, А.М., Заяитц, А., «Протоколы кислотоустойчивых пятен» В архиве 2011-10-01 на Wayback Machine, Американское общество микробиологии, 8 сентября 2008 г. Проверено 1 ноября 2014 г.
  4. ^ Мюррей П.Р., Барон Э., Пфаллер М., Теновер Ф., Йолкен, ред. Руководство по клинической микробиологии. 7-е изд. Вашингтон, округ Колумбия: ASM, 1999.
  5. ^ Барон EJ, Finegold SM. Диагностическая микробиология Бейли и Скотта. 8-е изд. Сент-Луис: Мосби, 1990.
  6. ^ Учебник микробиологии Анантанараяна и Паникера, 9-е издание, Universities Press (Индия), 2013 г., стр. 353
  7. ^ https://faculty.mtsac.edu/cbriggs/Micr-22NewLabmanual2Aug2018.pdf